經(jīng)過(guò)自主研發(fā)和兼并重組不斷擴(kuò)展企業(yè)產(chǎn)品線，逐步發(fā)展為試劑的專(zhuān)業(yè)制造商和電子商務(wù)集成供應(yīng)商，成為全球試劑職業(yè)發(fā)展的者。在開(kāi)始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全。

    一：細(xì)胞與試劑方面：

    1.細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢合適)

    2.培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液或MEM 培養(yǎng)液或199 等合適細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)

    3.滅活小牛血清、慶大霉素溶液（1 萬(wàn)單位）

    4.7.5％NaHC03 溶液
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    5.0.25％胰蛋白酶

    6.PBS 洗液。

    二;試驗(yàn)小用具方面：

    1.小方瓶(100m1)

    2.克氏瓶

    3.膠塞

    4.吸管(10ml、1m1）

    5.細(xì)胞吹打管（20 ml）(以上用具需經(jīng)121℃至少15 分鐘高壓滅菌)

    6.C02 孵箱

    7.超凈臺(tái)

    8.倒置顯微鏡

    9.4℃、- 20℃冰箱
 
    三：細(xì)胞傳代的操作過(guò)程

    1.挑選細(xì)胞：鏡檢細(xì)胞，挑選成長(zhǎng)狀態(tài)杰出，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形狀好無(wú)污染、無(wú)反常及可疑病變細(xì)胞。

    2.制造細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比制造MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液100ml 內(nèi)，參加滅活小牛血清10m1，慶大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。（僅供一般參考）。

    3.消化細(xì)胞：先用PBS 洗液沖刷細(xì)胞外表1-2 次，每次10m1，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)參加0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，細(xì)胞瓶平放，使消化液徹底覆蓋細(xì)胞外表。

    4.至細(xì)胞徹底脫落到胰酶中：每瓶參加10m1 細(xì)胞培養(yǎng)液吹打渙散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中，再參加10m1 細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。

    5.加塞，置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2～4 天成片(由細(xì)胞接種濃度決定)。

    6.填寫(xiě)傳代記錄。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司